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SHP-77人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
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| 報 價： | 1 |
SHP-77人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞正在出售的產(chǎn)品：人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293] CM-R112大鼠小腦顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基家兔腎細(xì)胞;RABK3 PA317細(xì)胞，逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝用的人胚胎成纖維細(xì)胞 小腸結(jié)腸耶爾森氏菌 豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1 人食道上皮細(xì)胞(HEEC)(5×105 )
SHP-77人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁生長 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 人細(xì)胞系 |
商品介紹
細(xì)胞數(shù)量：1*10^6
細(xì)胞運(yùn)輸：干冰運(yùn)輸（1ml凍存管）或活細(xì)胞運(yùn)輸（T25瓶）
培養(yǎng)基： 準(zhǔn)備RPMI-1640 87% 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；GlutaMAX-1谷an酰胺，1%；Sodium Pyruvate丙酮酸鈉，1%；P/S青霉su-鏈霉su，1%。
培養(yǎng)條件：培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
細(xì)胞凍存：液氮凍存（90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配）
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存
公司正在出售的產(chǎn)品：
防御素β131(DEFβ131)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 131 (DEFb131)
CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)
BTLA重組小鼠 BTLA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
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小鼠乙型肝表面抗體(HBsAb)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human soluble cluster of differeiation 28 (sCD28) ELISA Kit 人可溶性白細(xì)胞分化抗原28(sCD28)檢測試劑盒
Humanglamicaciddecarboxylase,GADELISAKit 人谷脫羧酶(GAD)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor6-keto-PGF1a(Rabbit6-keto-prostaglandinF1a)ELISAKit兔6同前列腺素F1a
飲料L-蘋果酸比色法定量檢測試劑盒20次
MousemajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/H-2ⅠELISAKit小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
SHP-77人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞血管活性腸肽 (VIP) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
內(nèi)脂素 / 內(nèi)臟脂肪素 (Visfatin) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
軟骨糖蛋白 39(YKL-40) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(mouse ACE) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
大鼠鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶激酶(CaMKK)檢測試劑盒 ，英文名： CaMKK ELISA Kit
Porcine low molecular weight heparin (LMWH) ELISA Kit 豬低分子肝素(LMWH)檢測試劑盒
轉(zhuǎn)基因植物Bar基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMCP-1/CCL2/MCAF(Humanmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor)ELISAkit人單核細(xì)胞趨化蛋白1
體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)總活性熒光定量檢測試劑盒20次
ELISAKitWGA麥胚凝集素/凝集蛋白
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
