THLE-2人肝永生化細(xì)胞

商品屬性

商品介紹

種屬來源：人

性別年齡：男性，成人

生長特性：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：上皮樣

細(xì)胞規(guī)格：1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養(yǎng)條件：THLE-2培養(yǎng)基37 ℃, 5% CO2

凍存條件：90% FBS + 10% DMSO

傳代方法：1:3傳代, 2-3天傳1代

細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細(xì)胞凍存

公司正在出售的產(chǎn)品：

神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)重組蛋白 Recombinant Enolase, Neuron Specific (NSE)

CD4 Protein Human 重組人 CD4 / LEU3 蛋白

IgG1重組人 IgG1-Fc 蛋白 (103 Cys/Ser) Protein

HA Protein H8N4 重組甲型流感 H8N4 (A/pintail duck/Alberta/114/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

RNF43重組人 RNF43 蛋白 Protein

IgG1重組人 IgG1-Fc 蛋白 (103 Cys/Ser) Protein

神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)重組蛋白 Recombinant Enolase, Neuron Specific (NSE)

RNF43重組人 RNF43 蛋白 Protein

CD4 Protein Human 重組人 CD4 / LEU3 蛋白

HA Protein H8N4 重組甲型流感 H8N4 (A/pintail duck/Alberta/114/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

小鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human leukocyte aigen C (HLA-C) ELISA Kit 人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)檢測試劑盒

HumanL-phenylalanine,LPAELISAKit 人苯(LPA)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

rabbitImmunoglobulinM,IgM檢測試劑盒兔子免疫球蛋白M(IgM)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

油菜樣品處理試劑盒20次

Mouseierferon-inducibleprotein10,IP-10ELISAKit小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

THLE-2人肝永生化細(xì)胞小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠S轉(zhuǎn)移酶θ1(GSTT1)檢測試劑盒 ，英文名： GSTT1 ELISA Kit

Porcine B cell lymphoma factor 2 (Bcl-2) ELISA Kit 豬B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)檢測試劑盒

菌(VC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIP-3Alpha/CCL20(HumanMacrophageInflammatoryProtein-3Alpha)ELISAkit人巨噬細(xì)胞性蛋白3α

體液精(arginine)含量化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitIL-18犬白介素18

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。